基因检测为早期癌症筛查、诊断及预防做精准判断

基因突变检测在临床上主要可以用于疾病的早期筛查、诊断及预后判断

1、多种恶性肿瘤,如恶性黑色素瘤、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌等存在不同比例的B-raf基因突变;

2、结直肠癌、胰腺癌、肺癌等存在不同比例的K-ras基因突变。

3、良性肿瘤的患者若是检出B-raf或K-ras基因突变,提示有肿瘤恶变的可能。

4、PIK3CA基因突变检测,对肺癌、乳腺癌、结直肠癌等肿瘤患者的早期筛查、诊断及预后具有重要意义。

基因检测为早期癌症筛查、诊断及预防癌症做精准判断

基因突变检测的认知:

基因突变检测是指通过建立一系列电泳,分析DNA构象或解链特性,或者利用DNA变性和复性等特性,进行DNA突变的分析。

基因突变检测常用方法:

1、聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术。一般用于检测已知的突变位点。

2、焦磷酸测序法。基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。

3、单链构象异构多态分析技术。依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳的迁移率不同,从而将正常链与突变链分离出来。与测序法相比,灵敏性更高。

4、探针扩增阻滞突变系统。是利用Tap DNA聚合酶缺少3′到5′外切酶活性,聚合酶链反应引物的3′端末位碱基必须与其模板DNA互补才能有效扩增的原理。通过设计适当的引物以检测突变基因。

基因检测为早期癌症筛查、诊断及预防癌症做精准判断

5、高效液相色谱法。是基于发生错配的杂合双链DNA与完全匹配的纯合双链DNA解链特征的差异而进行检测的,可检测出含有单个碱基的置换、插入或缺失的异源双链片段。与测序法相比,该法简单、快速,不仅可用于已知突变的检测,还可用于未知突变的扫描。但只能检查有无突变,不能检测出突变类型,结果判断容易出错。

6、微数字聚合酶链反应。该方法为将样品作大倍数稀释和细分,直至每个细分试样中所含有的待测分子数不超过1个,再将每个细分试样同时在相同条件下聚合酶链反应后,通过基因芯片逐个计数。该方法为绝对定量的方法。

7、高分辨率熔解曲线分析技术。利用不同长度或不同碱基组成的DNA序列溶解曲线不同的原理,在聚合酶链反应后直接运行高分辨率熔解即可完成对样品突变分析。该技术是一种灵敏度100%的表皮生长因子受体基因突变筛选技术,可用于体细胞突变的检测。